EpiDerm teszt

Kép forrása
http://www.premiumbeautynews.com/New-skin-irritation-test-validated,497
Leírás szerzője
KÖRINFO

Az EpiDerm teszt célja, hogy megállapítsuk egy adott vegyianyag bőrkorróziót és irritációt okozó hatását. A teszt során mérjük az MTT nevű tetrazólium sóoldat kék színének optikai denzitását, mely a sejtek mitokondriumában található dehidrogenáz enzim hatása következtében változik át sárga színűből kékre. A tesztben 3 percig tesszük ki a bőrlemezkéket a corrozív anyagnak. Amennyiben nem bizonyul korrozívnak, 1 órán keresztül még úgy hagyjuk és megfigyeljük a biztonság kedvéért, hogy a korróziót okozó volta teljes mértékben kizárható legyen. A tesztben humán stratum corneumot használunk. A teszt mind folyadékok, mind oldható szilárd anyagok vizsgálatára alkalmas.

Kivitelezés: A tesztlemezt felhasználás előtt minimum 1 órán keresztül 37±1°C-on, megfelelően párás atmoszférában, 5±1% CO2 tartalmú levegőben inkubáljuk. A pozitív kontroll 8n-os KOH kezelés 3 és 60 percen keresztül. A negatív kontroll steril ionmentes víz. 50 μl folyadékmintát vagy 25 mg szilárd mintát helyezünk a bőrlemezkék tetejére, majd 3 és 60 percig inkubáljuk a mintákat. A kultúrákat áthelyezzük egy olyan lemezre, mely mélyedésenként 0,3 ml MTT reagenst tartalmaz (1mg/ml) és 3 órán keresztül inkubáljuk. 2 órán keresztül 2ml izopropanolban rázatjuk a bőrlemezkéket, ezzel extrahálva tartalmukat. Az optikai denzitását az így kapott oldatnak 550 nm-en mérjük.

Az eredmények interpretálása: azok az anyagok, melyek a sejtkultúra életképességét legalább 50%-ra csökkentik, korrozívnak tekintendők. Amelyek 60 perc alatt csökkentik a sejtkultúra életképességét 15−50%-ra, szintén korrozívnak tekintendőek. Amennyiben 3 perc után csak 15−50%-a pusztul el a sejteknek, nem beszélünk korrozív anyagról.

A vizsgálat pontos részleteiről ebben a dokumentumban olvashat angol nyelven:http://www.iivs.org/pages/methods/EPIDERM.corr_symbol.pdf

Szerző által felhasznált források